Hiv Pozitif Doğrulama Testi

Dördüncü kuşak Elisa testinin aktif bulunması halinde doğrulama işleminde merkezin olanaklarına göre Western Blot ya da Line İmmunuassay gibi antikora dayalı testler ya da özellikle ilerlemiş Hiv enfeksiyonu kuşkusu olan durumlarda Hiv RNA yı saptamaya yönelik nükleik asit temelli testler kullanılır.

Bu amaçla antiretroviral tedavinin izlenmesi için onaylanmış kitler kullanılabilir. Fakat bu kitler ile elde edilebilecek pozitif sonuçların yorumunda dikkatli olunmalıdır.Çünkü kopya/mL miktarı 10 000 den düşük pozitifllikler kesin olarak yorumlanmamalıdır.Böyle durumlarda ikinci bir örnekle yapılacak testin sonucana ya da tekrar bir antikora dayalı tst yapılarak kararverilmelidir.

Ayrıca Hiv ile enfekte kişilerin %3-4 ünde hiv RNA negatif olabileceğinden,tarama amaçlı antikor testleri pozitif olduğu halde nükleik e dayanan testler negatif durumunda olabilir.Böyle durumlarda yapılması gereken antikora dayalı testlerin sonucuna göre hareket etmek ya da antikora dayalı testleri tekrarlamaktır.

Doğrulama aşamasında antikora dayalı doğrulama testi ile kesin sonuç alınmassa,doğrulamak için nükleik asit temelli testlere geçilir.Yine kesin sonuç alınmaz ya da testin yapıldığı yerde nükleik asitli testlerin imkanı yoksa 4. kuşak Elisa Testi 10 gün-1 ay içinde tekrar edilebilir.

⦁    HIV ile enfekte kişilerin tanı ve izleminde rutin olarak başlıca iki grup deney kullanılır: serolojik tanı (özgül antijen-antikor saptayan immunoassayler) ve moleküler tanı

⦁    HIV ile enfekte kişilerin hem immünolojik hem de virolojik açıdan değerlendirilmeleri gereklidir.

⦁    Günümüzde kesin doğru tanıya gereksinimin yanı sıra, erken tanıya, tanı konduktan sonra hastalığın ilerlemesi ile ilgili bilgi verecek ve farklı tedavi stratejilerinin etkinliğini tayin edecek hasta takibine de ihtiyaç vardır. HIV ile enfekte kişilerin bu amaçla monitörizasyonunda önemli gelişmeler olmuş ve viral yük tayininde moleküler yöntemler kullanılmış ve bunlar çok iyi standardize edilmiş ticari kitler haline dönüştürülmüştür. Antiviral ilaçların yaygın kullanımı ve direnç gelişimi HIV enfeksiyonunda antiviral ilaç duyarlılığının tayinini de gündeme getirmiştir . Antiviral duyarlılık tayininde hızlı standart yöntemler rutin tanıya girmiştir. Bu arada araştırma laboratuvarlarında PCR ile amplifikasyon ve dizi analizi ile viral genotipin moleküler analizi yapılmaktadır. Bu da farklı izolatlar arasındaki ilişkileri ve viral değişkenliği göstermede en güçlü araçtır.

⦁    Yenidoğan ve 18 aya kadar bebeklerde ve daha büyük çocuk ve erişkinde tanıda izlenecek akış şemaları farklılık gösterir. Anneden geçen antikorların varlığı 18 aya kadar devam ettiği için bebeklerde bu süre boyunca serolojik tanının yeri yoktur.
NOT: Buradaki öneriler, kan bağışları ile organ ve doku bağışlarına yönelik taramaları kapsamamaktadır.

⦁    Tarama ve tanıda iki aşamalı bir yaklaşım benimsenmektedir: Önce bir tarama testinin yapılması ve „reaktif‟ bulunan örneklerin doğrulama için incelemeye alınması.

⦁    HIV enfeksiyonunun varlığı ancak doğrulama incelemesinin sonucunun pozitif olması ve seropozitifliğin ikinci bir örnekle de doğrulanması halinde kanıtlanmış olur.

HIV RNA Pozitif    ≤10.000 kopya/mL - büyük olasılıkla yanlış pozitiflik   
HIV RNA Pozitif     ≥10.000 kopya/mL - ikinci test ile teyit edilir

Doğrulama testleri arasında en sık kullanılan test WB‟dir. Western blot ile virüsün tüm yapı proteinlerine karşı oluşmuş antikorları ayrı ayrı saptamak mümkündür. Ancak önceleri daima kesin sonuç veren bir doğrulama testi oladuğu düşünülen Western blot ile de her zaman kesin olmayan durumların söz konusu olabildiği saptanmıştır.

Yukarıdan aşağıya gp160, gp120,p66,p55,p51,gp41,p31, p24, p17 ve p15 bantları vardır. Hiç bant içermeyen şerit negatif kabul edilir. Western blot sonucunun pozitif kabul edilmesi için belirli bantların mutlaka bulunmaları gereklidir. Negatiflik ve pozitiflik kriterlerine uymayan bantları içerenler kuşkulu WB sonucu kabul edilmektedir. WB yöntemi EIA ve hızlı testlere göre daha özgül fakat daha az duyarlıdır.

Doğrulama Merkezleri
 
Mikrobiyoloji Referans Laboratuvarları Daire Başkanlığı
Ulusal AIDS/HIV Doğrulama Merkezi ve Viral Hepatit Referans Laboratuvarı
Sağlık Mahallesi, Adnan Saygun Caddesi, No: 55, F Blok 1.kat 06100 – Sıhhiye/ANKARA
Tel: 0312 565 5551 / 5552 / 5553
Faks: 0312 565 5569

İzmir Halk Sağlığı Laboratuvarı
Viroloji Laboratuvarı, HIV/AIDS Tanı ve Doğrulama Merkezi 52/18 sok. No: 4, 35350, Poligon - İzmir
Tel: 0232 224 1212
Faks: 0232 224 5989

Dokuz Eylül Üniversitesi Tıp Fakültesi
Tıbbi Mikrobiyoloji AD Balçova İzmir
Tel: 232- 4124501 (sekreterlik)

Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi
Tıbbi Mikrobiyoloji AD
Viroloji ve Seroimmunoloji Laboratuvarı 35100, Bornova-İzmir
Tel: 0232 444 1 343, 0232 390 3303 / 3019

Gülhane Askeri Tıp Akademisi (GATA)
Tıbbi Mikrobiyoloji AD Viroloji Bilim Dalı
Etlik, Keçiören – Ankara
Tel: 0312 304 2000 / 0312 304 1810
Faks: 0312 304 2700
 
İstanbul Üniversitesi Cerrahpaşa Tıp Fakültesi
Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Anabilim Dalı, 34303 Cerrahpaşa - İstanbul
Tel: 0212 414 3077
Faks: 0212 586 1547

İstanbul Üniversitesi Tıp Fakültesi
Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı
Viroloji ve Temel İmmünoloji Laboratuvarı, Çapa - İstanbul
Tel: 0212 414 2000
Faks: 0212 414 2037

Deri ve Tenasül Hastalıkları Hastanesi
Mikrobiyoloji Laboratuvarı,
Zuhuratbaba Mahallesi, Dr Tevfik Sağlam Caddesi, No: 26,  Bakırköy – İstanbul
Tel: 0212 572 8293 / 94, 95, 96
Faks: 0212 572 8279